目的:探讨自制简易新装置对小鼠断尾取血的采血效果,建立简易、安全、方便、省时的小鼠采血方法。方法:用废弃的50 ml离心管、纸盒、纱布等制作2个采血装置,并列固定于同一6孔板上,对50只6～8周龄的昆明系小鼠进行重复4次断尾采血。结果:自制的固定装置价格低廉、制作简单、操作灵活,并可同时为2只小鼠采血,采血量可达0. 25～0. 50 ml,实验中小鼠无伤残、无死亡。结论:自制的小鼠固定装置采血量高、安全性好,是理想的小鼠断尾采血装置。

目的:建立白细胞滤器(Plasmodipur)联合Percoll密度梯度离心浓集纯化红内期间日疟原虫(P.v)的方法。分析和比较皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性的差别。方法:P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,经60% Percoll浓集其中的感染红细胞(iRBC)。采用皂素法和冻融法从iRBC中释放疟原虫,经超声粉碎,所获P.v可溶性抗原和同样处理的正常红细胞(nRBC)成分经SDS-PAGE电泳分析其组分差别,并应用P.v感染者、正常对照混合血清与相应的抗原进行免疫印迹分析,确定具有免疫原性的抗原组分。结果:115例P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,每10个油镜视野中WBC残留≤ 5个99例(86.1%),经60% Percoll浓集的35例样本中,共有30例(85.7%)能提高iRBC比例至60%以上。SDS-PAGE电泳分析,皂素处理与冻融处理的P.v抗原分别显示出6条和2条P.v特异性蛋白条带。免疫印迹分析表明,P.v感染者混合血清能特异性地识别22、24.5、29、35、36 kDa皂素处理的P.v抗原,26、49、59、63、115、120 kDa冻融处理的P.v抗原。结论:血样中疟原虫皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性存在明显差异,其中皂素处理的22 kDa抗原组分具有较强的免疫原性,其作为P.v特异性诊断抗原的价值有待进一步研究。

目的:检测猪囊尾蚴病患者外周血T细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外诱生IFN-γ、IL-4的水平,探讨T细胞亚群在感染免疫中的调控。方法:采用流式细胞仪检测猪囊尾蚴病患者PBMC中T细胞亚群比例和IFN-γ/IL-4水平;用Cellquest软件或WinMDI2.8软件数据分析。结果:猪囊尾蚴病患者T细胞亚群CD3⁺与CD4⁺细胞百分率均较正常人升高(P<0.01),CD4⁺/CD8⁺比值亦较正常人升高(P<0.01);PBMC中分泌IFN-γ及IL-4的CD3⁺细胞百分率与正常人差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:猪囊尾蚴病患者PBMC中CD3⁺、CD4⁺细胞百分率显著升高,T细胞亚群比例失调,免疫功能紊乱。